Cell sorting facs machine

A máquina de separação celular FACS (Fluorescence-Activated Cell Sorting) é um equipamento de alta precisão que classifica células vivas individualmente com base em suas propriedades fluorescentes e de dispersão de luz.

Sobre o tema

A tecnologia FACS, desenvolvida a partir da citometria de fluxo, permite analisar e separar células em tempo real. O princípio baseia-se no uso de lasers que excitam fluoróforos ligados a anticorpos específicos ou proteínas fluorescentes expressas pelas células. As células em suspensão passam por um fluxo laminar estreito e são excitadas uma a uma. Sensores detectam a fluorescência e a dispersão da luz, gerando um perfil multiparamétrico que define características como tamanho, granulosidade e expressão de marcadores de superfície ou intracelulares.

A separação é realizada por meio de um mecanismo de deflexão eletrostática. Gotículas contendo células individuais são carregadas eletricamente com base na decisão do sistema, e então desviadas por campos elétricos para recipientes distintos. Esse processo pode atingir velocidades de milhares de células por segundo, com pureza superior a 99% em configurações otimizadas. Aplicações incluem isolamento de subpopulações celulares raras, como células-tronco hematopoiéticas ou células tumorais circulantes, e preparação de amostras para sequenciamento de RNA de célula única.

O desenvolvimento da FACS revolucionou a imunologia e a biologia celular. Nos anos 1960, os primeiros citômetros de fluxo foram criados por Wolfgang Göhde e Leonard Herzenberg, este último creditado pela invenção do FACS. Hoje, equipamentos modernos como o BD FACSAria ou o Sony SH800 oferecem até 4 lasers e 18 detectores, permitindo análise simultânea de múltiplos parâmetros. A manutenção requer calibração rigorosa com beads de referência e limpeza periódica para evitar contaminações e garantir precisão.

Embora extremamente útil, a FACS tem limitações: exige células em suspensão e pode causar estresse mecânico. Alternativas como a classificação magnética (MACS) são menos precisas, mas mais suaves. A escolha entre técnicas depende da aplicação: pureza versus viabilidade celular. Laboratórios de ciências da vida e hospitais de pesquisa frequentemente mantêm uma central de citometria com técnicos especializados para operar esses equipamentos complexos.

Perguntas frequentes

O que significa a sigla FACS?

FACS significa Fluorescence-Activated Cell Sorting, ou separação de células ativada por fluorescência. É uma técnica derivada da citometria de fluxo que permite classificar células vivas individualmente com base em suas propriedades fluorescentes.

Qual a diferença entre FACS e MACS?

FACS utiliza lasers e detecção óptica para separar células com alta pureza (até >99%) e multiparâmetros, enquanto MACS (separação magnética) usa anticorpos conjugados a microesferas magnéticas e um campo magnético, sendo mais rápido e menos estressante, porém com menor pureza e sem possibilidade de análise multiparamétrica.

Para que serve a FACS na pesquisa biomédica?

A FACS é usada para isolar subpopulações celulares raras, como células-tronco, células tumorais circulantes ou linfócitos específicos; purificar células para cultura ou transplante; e preparar amostras para sequenciamento de RNA de célula única, permitindo estudos de heterogeneidade celular e desenvolvimento de terapias.